产品货号:
ZN1861
中文名称:
免疫荧光染色试剂盒(山羊IgG,Cy3)
英文名称:
SABC-Cy3(goat IgG)kit
产品规格:
100T|200T|500T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒基于SABC系统,适用于一抗类型为山羊IgG的免疫荧光检测。SABC-Cy3将链霉亲和素-生物素引入荧光系统,能进一步提高敏感性及降低背景。Cy3比传统上的荧光更具有亲水性,因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合,从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3在554nm激化,在568~574nm发射荧光,呈鲜红色。
保存:4℃,切勿冷冻,有效期一年。
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组分 | 100T | 200T | 500T | 效价 | 说明 |
正常兔血清 | 1mL | 2mL | 5mL | 1:10 | 用于组织切片的封闭 |
生物素标记兔抗山羊IgG | 100mL | 200μL | 500μL | 1:100 | 生物素标记二抗 |
SABC-Cy3 | 100mL | 200μL | 500μL | 1:100 | SABC-Cy3荧光染料 |
滴瓶 | 3个 | 稀释试剂用 |
保存:4℃,切勿冷冻,有效期一年。
- 粘片剂APES(ZN1946)或POLY-L-LYSINE(ZN1945)。
- EDTA修复液(ZN1951)。
- 0.02M PBS(pH7.2~7.6)配法(ZN2950):1000mL蒸馏水中加氯化钠9g,Na2HPO4·12H2O 7g,NaH2PO4·2H2O 0.5g。
- 石蜡片热修复染色步骤:
- 石蜡片酶消化染色步骤:
将A程序的第4步:滴加酶消化液室温5~10min。酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。蒸馏水洗2min×3次。 - 石蜡切片酶不消化/修复程序:
对于不需要微波修复或消化的抗原,省略A程序中的第4步即可。 - 细胞片的染色步骤:
- 爬片。圆形盖破片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine),灭菌,备用。贴壁细胞消化后加入放有盖玻片的24孔板中培养1~2天,使细胞贴壁。悬浮细胞则处理后直接涂片,使细胞贴附。
- 固定。4℃预冷4%多聚甲醛固定20min或冷丙酮固定10min。蒸馏水洗2min×3次。
- 打孔。0.25% Triton X-100处理细胞15min。(若采用丙酮固定则此步骤可省略)
- 酶消化处理室温5~10min。酶消化可选用复合修复液(ZN1952)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)。蒸馏水洗2min×3次。
- 滴加稀释的正常兔血清封闭液(稀释比1:10),室温20min,甩干,勿洗。
- 滴加适当稀释的一抗,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5min×3次。
- 滴加稀释的生物素标记兔抗山羊IgG,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
- 滴加稀释的SABC-Cy3,37℃孵育30min。PBS冲洗,5min×3次。
- 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
- 荧光显微镜观察。
- 爬片。圆形盖破片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine),灭菌,备用。贴壁细胞消化后加入放有盖玻片的24孔板中培养1~2天,使细胞贴壁。悬浮细胞则处理后直接涂片,使细胞贴附。
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